sanger测序是第几代(sanger测序是一代测序吗)

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谈谈基因测序技术经历了哪几个发展阶段,这些技术的特点分别是什么

1、科研市场上三代测序最常见的莫过于PacBio,辅以冉冉上升的新星Nanopore等,主打长读长策略,直击二代测序碎片化序列的软肋,在基因组de novo上表现不俗,错误率较高,但可被矫正。

2、二代测序优点是相比一代测序大幅降低了成本,保持了较高准确性,并且大幅降低了测序时间,将一个人类基因组从3年降为1周以内。缺点是序列读长方面比第一代测序技术要短很多。

3、技术1:双脱氧链末端终止法和化学降解法。原理:双脱氧链末端终止法:利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。化学降解法:它通过灵敏的银染方法检测凝胶中的条带。

4、总的说来,第一代测序技术的主要特点是测序读长可达1000bp,准确性高达9999%,但其测序成本高,通量低等方面的缺点,严重影响了其真正大规模的应用。因而第一代测序技术并不是最理想的测序方法。

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第一代测序—Sanger法测序又称双脱氧法测序

1、桑格测序法,又称双脱氧链终止反应,与 化学降解法 以及其衍生方法统称为第一代 DNA测序 技术,为 人类基因组计划 所使用主要测序方法,人类基因组中用的是基于sanger法的半自动测序仪。

2、一代测序是上世纪70年代由Sanger和Coulson开创的DNA双脱氧链终止法测序,也称为Sanger测序。在1977年完成第一个基因组序列(噬菌体X174),全长共计5375个碱基。

3、最早期的双脱氧法,称之为Sanger 法(Sanger et al. 1977, 1980) ,是利用大肠杆菌DNA 聚合酶I 的Klenow 片段而发展起来的 。引物在需要测序的单链DNA 模板的3′ 端进行复性(图1)。

4、第一代DNA测序:双脱氧终止法 即sanger测序法。

5、可以用以下测序方法 第1 代测序技术 荧光标记的Sanger 法—— 在分子生物学研究中,DNA的序列分析是进一步研究和改造目的基因的基础。

新一代测序技术

1、新一代测序技术(next-generation sequencing, NGS)的起点是2005年以来Roche 45Illumina GA/HiSeq、Life SOLiD/Ion Torrent、PacBio RS技术的发明,新技术使测序通量快速增加,测序成本极大降低。

2、条件不同 从头测序的条件是不依赖于任何物种基因组;重测序的条件是在已知物种基因组的情况下进行的。

3、Sanger测序技术。此技术也称为链终止法,这是最早的DNA测序技术。

4、合成法测序原理:将基因组DNA的随机片段附着到光学透明的玻璃表面(即Flow cell),这些DNA片段经过延伸和桥式扩增后,在Flow cell上形成了数以亿计Cluster,每个Cluster是具有数千份相同模板的单分子簇。

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